用cy5-a-bungarotoxin做实验时,咱们得注意这几点:这货到底是啥?

用Cy5-a-Bungarotoxin做实验时,咱们得注意这几点:这货到底是啥?它就是把α-Bungarotoxin,一种从台湾银环蛇毒液里提取的74个氨基酸单链多肽,跟Cy5这种近红外荧光染料绑在了一起。那个Cy5荧光染料有啥特点?它是花菁类的,激发波长649 nm,发射波长670 nm,很适合搞近红外成像。它怎么跟BTX连上的?就是通过分子结构里的NHS酯,跟蛋白质表面的伯胺基团发生反应,把它牢牢固定住,这样荧光信号和毒素的活性才能同步保留。这对做神经肌肉接头研究特别有用,能帮咱们定位、示踪或者定量检测细胞、组织里的nAChR。 操作的时候得防着点儿。如果出现非特异性结合怎么办?可以多洗几次(比如3次每次10分钟),或者拿含1% BSA的缓冲液封一下。浓度怎么调?根据样本类型定,一般孵育浓度推荐1-10 μg/mL,时间也得看情况给30-120分钟。全程要避光,最好用铝箔把容器包起来,用显微镜看的时候曝光时间别太长(最好低于500 ms)。 其他需要注意的安全事项:这东西是固体或者液体,能溶于DMSO、DMF这些有机溶剂,稍微溶于水。买的话是西安凯新生物科技有限公司出品的,得存放在零下20℃以下的冷冻箱里,注意别反复冻融。干这行记得戴防护装备,别碰到皮肤和眼睛。万一碰到了赶紧用大量清水冲干净,赶紧去找医生看。 除了这个试剂,厂家还提供了其他一系列染料和试剂盒呢:比如Amino-11-UTPCyanine7 alkyne、Cyanine5.5 DBCO、AF 488 TFP ester、Cyanine7.5 dimethylsulfo-Cyanine5.5 DBCO、BDP 576/589 NHS ester、LumiTracker Lyso Green、sulfo-Cyanine7.5 amine、Universal CPG type II, 500、ALumiPure DNA Gel Extraction Kit、TCO-PEG4-NHS ester (axial isomer)、LumiTracker Mito Orange、CMTMRosYODi-3还有那个红色荧光核酸染料。这些都是科研用的哈,千万别拿来做人体试验。