就咱平时聊的流式细胞术，不管是在实验室做研究还是去医院看病，用得越来越多。说到查细胞死不死，Annexin V配PI那个组合简直就是经典套路。Annexin V专门盯着细胞膜上冒头的磷脂酰丝氨酸（PS），而PI就是拿来分清楚到底是晚期凋亡还是坏死的。 可这俩老搭档也有个大毛病，特别是想顺便看看细胞里的东西的时候。要是用多聚甲醛这些固定剂，荧光信号就没了，连PI都沾不上边，结果肯定靠不住。再说染完色要是不立马测，数据准跑偏。最吓人的是万一碰上结核这种病原体的样本，不固定直接测太危险。更别提没法做胞内染色了，想研究细胞里面分子咋变就难了。 到了2017年，Mariotti他们搞出了个叫FAN的新法子。核心就是用能耐得住固定的试剂换掉传统的那两种。具体咋操作呢？首先是用荧光标记的抗PS抗体顶替Annexin V。这个抗体不用钙离子就能绑定PS，固定之后信号稳得一批。 再就是拿胺反应活力染料ViD把PI换掉。ViD能直接跟细胞里的胺基连上，就算破了膜、固定了好几轮信号还是杠杠的。比起以前那一套，FAN这新招数可太香了： 既能先把样本固定好破个膜（Fixed），安全地对付病原体感染的样本；还能顺便把里面的TNF-α、MHC-II还有菌载量都给测了出来；存个两周常温避光放着都没事；死细胞洗干净了也不再瞎蹭抗体。 总之这FAN法给流式细胞术打开了新大门。它不光治好了以前的各种毛病（比如Annexin V和PI那些），还让咱们研究细胞里分子变化有了更多可能。比如咱们就能放心大胆地去测结核样本，一边看细胞死没死一边数里面的TNF-α和MHC-II到底有多高。